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novocib:PRECICE® HPRT Assay Kit

簡(jiǎn)要描述:novocib:PRECICE® HPRT Assay Kit 貨號(hào):#K0709-01-2

  • 產(chǎn)品型號(hào):#K0709-01-2
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2025-04-29
  • 訪  問(wèn)  量:522

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)#K0709-01-2
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novocib:PRECICE® HPRT Assay Kit 貨號(hào):#K0709-01-2

24 analyses (8 samples in triplicate) with HPRT enzyme

novocib:PRECICE® HPRT Assay Kit



包括活性人 HPRT 酶

PRECICE® HPRT 檢測(cè)試劑盒提供了第一個(gè)用于測(cè)量 HPRT 活性的非放射性方案,采用方便的 96 孔板形式。

次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 (HPRT, EC 2.4.2.8) 是嘌呤補(bǔ)救途徑的關(guān)鍵酶,由高度可變的 HPRT1 基因編碼。已描述與人類(lèi)遺傳疾病相關(guān)的 HPRT1 基因中有 300 多種突變導(dǎo)致 HPRT 酶部分或全缺乏。完*性 HPRT 缺乏癥是一種罕見(jiàn)的人類(lèi)遺傳病,也稱(chēng)為 Lesch-Nyhan 綜合征。在某些情況下,痛風(fēng),更常見(jiàn)的嘌呤紊亂,也可能繼發(fā)于 HPRT 缺乏癥(Ceballos-Picot I. 等人,2010 年)。HPRT1 基因的高變異性使基因檢測(cè)復(fù)雜化。目前,使用放射性標(biāo)記的 14C-次黃嘌呤在色譜測(cè)定中測(cè)試紅細(xì)胞裂解物中的 HPRT 酶功能 (Cartier, P. et al, 1968)。

原理:
通過(guò)追蹤 IMP 脫氫酶氧化的 IMP 的產(chǎn)生來(lái)測(cè)量 HPRT 活性。這個(gè)過(guò)程導(dǎo)致 NADH2 的形成,在 340 nm 處通過(guò)分光光度法連續(xù)監(jiān)測(cè)以進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)量。


檢測(cè)范圍廣

檢測(cè) 6.75 nmol/h/ml 至 340 nmol/h/ml 的 HPRT 活性,能夠表征*全和部分缺陷。

準(zhǔn)確

測(cè)量不精確度:1.5%(運(yùn)行內(nèi))、5%(日間)和 6.5%(總計(jì))。

快

在 2 小時(shí)內(nèi)同時(shí)分析多達(dá) 15 個(gè)樣品,一式三份。

方便

無(wú)需樣品制備或事先滅活細(xì)胞 5'-核苷酸酶。細(xì)胞裂解物直接用于連續(xù)監(jiān)測(cè) HPRT 活性。

驗(yàn)證

通過(guò) PRECICE® HPRT 檢測(cè)試劑盒測(cè)量的紅細(xì)胞、PBMC 和培養(yǎng)細(xì)胞裂解物中 HPRT 的比活性與先前通過(guò)放射化學(xué)程序獲得的活性相當(dāng)。


HPRT Activity

CellsPRECICE® HPRT Assay KitPublished DataReferences
RBC specimen 1 (n=4)76.94±2.5 nmol/h/mg of Hgb80–120 nmol/h/mg of hemoglobin4
RBC specimen 2 (n=12)78.03±5.52 nmol/h/mg of Hgb
RBC specimen 3 (n=4)88.7±3.41 nmol/h/mg of Hgb
PBMC specimen 1 (n=4)159.91±3.60 nmol/h/mg of protein
19.7±0.6 nmol/h/106 PBMC
343±18 nmol/h/mg of protein
10.2–18.0 nmol/h/106 PBMC
4
PBMC specimen 2 (n=4)152.30±4.94 nmol/h/mg of protein
21.3±0.42 nmol/h/106 PBMC
5
Human Dermal Fibroblasts (Invitrogen)70.91±2.67 nmol/h/mg of protein81–127 nmol/h/mg of protein6
W20-17 cells (ATCC)91.95±4.49 nmol/h/mg of protein
novocib:PRECICE® HPRT Assay Kit
基于 IMPDH 的 PRECICE® HPRT 測(cè)定的校準(zhǔn)曲線

每小時(shí) 340 nm 處吸光度增加的速率與人重組 HPRT 酶濃度的函數(shù)關(guān)系(NovoCIB,參考文獻(xiàn) E-Nov-9)。在*全反應(yīng)混合物中稀釋至最終血紅蛋白濃度 1mg/ml (n=4) 的 3 種不同對(duì)照溶血物對(duì)應(yīng)的吸光度變化由實(shí)心方塊、實(shí)心三角形和實(shí)心圓表示。插入片段顯示,在 21 ng/ml 至 1.5 μg/ml 的整個(gè)重組 HPRT 范圍內(nèi)觀察到線性相關(guān)性;單位相同。

Scientific Articles citing PRECICE® HPRT Assay kit from NOVOCIB:
  1. Ablation of Atp5if1 impairs metabolic reprogramming and proliferation of T lymphocytes and compromises mouse survival
    I. Romero-Carraminana, S. Dominguez-Zorita, P.B. Esparza-Molto, J. M. Cuezva (2024) iScience 27, 109863

  2. Electron transport chain inhibition increases cellular dependence on purine transport and salvage
    Z. Wu, D. Bezwada, F. Cai, J. Garcia-Bermudez, M. Ni, R.J. DeBerardinis, Cell Metab. 2024 Jun 7:S1550-4131(24)00190-6

  3. Therapeutic gene correction for Lesch-Nyhan syndrome using CRISPR-mediated base and prime editing (2023)
    G. Jang , H. Rim Shin, H.-S. Do , J. Kweon , S. Hwang , S. Kim, S. Hee Heo, Y. Kim, B. Lee Molecular Therapy - Nucleic Acids ; 31: 586-595.

  4. Rescuing compounds for Lesch-Nyhan disease identified using stem cell-based phenotypic screening (2020)
    V. Ruillier, J. Tournois, C. Boissart, M. Lasbareilles, G. Mahé, L. Chatrousse, M. Cailleret, M. Peschanski, A. Benchoua JCI Insight 5(4): e132094.

  5. Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase and inosine 5'-monophosphate dehydrogenase activities in three mammalian species: aquatic (Mirounga angustirostris), semi-aquatic (Lontra longicaudis annectens) and terrestrial (2015)
    M. Barjau Pérez-Milicua, T. Zenteno-Savín, D.E. Crocker, J.P. Gallo-Reynoso Front Physiol.; 6: 212.

  6. Prolonged fasting increases purine recycling in post-weaned northern elephant seals
    José Guadalupe So?anez-Organis, José Pablo Vázquez-Medina, Tania Zenteno-Savín, Andres Aguilar, Daniel E. Crocker, Rudy M. Ortiz J Exp Biol (2012) 215 (9): 1448-1455.




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  1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷(xiāo)代理。

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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

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